Description

Giới thiệu:

Alpha-thalassemia là bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể (NST) thường do đột biến α-globin nằm trên cánh ngắn NST 16 (16p13.3) qui định, gây giảm hoặc mất tổng hợp chuỗi α-globin. Alpha – thalassemia là một trong những bệnh huyết sắc tố phổ biến nhất, phân bố khắp thế giới. Đây là một trong những nguyên nhân hàng đầu, chiếm tới 60-90% các nguyên nhân gây phù thai ở các nước Đông Nam Á. Trong đó, tỷ lệ người mang gene đột biến mất đoạn dạng SEA ở Đông Nam Á là cao nhất, Ở Bắc Thái Lan là 14%, Nam Trung Quốc là 5.0-8.8%, Hồng Kông là 4,5%, Thái Lan là 3,7%, Bắc Đài Loan là 3.5%. Vùng gene α-globin gồm 2 gene: HbA1 (872bp) và HbA2 (864bp). Đột biến trên vùng gene α-globin được chia thành 2 nhóm: nhóm gây mất hoàn toàn số lượng chuỗi α-globin, làm mất chức năng của gene gây α0 -globin và nhóm làm giảm số lượng chuỗi α-globin gây α+ -globin. Theo nghiên cứu trên quần thể người Đông Nam Á, các đột biến thường gặp gây alpha-thalassemia gồm: mất đoạn lớn dạng SEA, THAI, α4.2, α3.7, đột biến diểm HbCs.

AccuLite Alpha-Thalassemia Genotyping Kit dựa trên nguyên tắc Long-range PCR, nhân bản những vùng trình tự đặc trưng bao quanh vị trí mất đoạn gây bệnh thiếu máu alpha-thalassemia ở người. Trạng thái đột biến hay không đột biến tại mỗi vị trí sẽ được phát hiện bằng sự xuất hiện các vạch sản phẩm với kích thước khác nhau trên kết quả điện di. Để phát hiện trạng thái đồng hợp hay dị hợp của 4 vị trí đột biến của một mẫu DNA bộ gene cần thực hiện 2 phản ứng multiplex Long- range PCR riêng biệt. Mỗi một phản ứng Long-range PCR sẽ cho phép phát hiện đồng thời trạng thái đột biến hay không đột biến với 2 vùng mất đoạn.

AccuLite Alpha-Thalassemia Genotyping Kit là công cụ hữu ích cho công tác nghiên cứu, chẩn đoán 4 đột biến alpha-thalassemia thường gặp ở quần thể người Việt Nam.

Lợi ích:

• Độ chính xác cao: AccuLite Alpha-Thalassemia Genotyping Kit (RUO) sử dụng công nghệ real-time PCR tiên tiến để phát hiện các đột biến mất đoạn với độ chính xác cao.
• Dễ sử dụng: Kit được thiết kế để dễ sử dụng với quy trình đơn giản và nhanh chóng.
• Tiết kiệm thời gian và chi phí: AccuLite Alpha-Thalassemia Genotyping Kit (RUO) giúp tiết kiệm thời gian và chi phí so với các phương pháp chẩn đoán truyền thống.

Nguyên lý hoạt động:

AccuLite Alpha-Thalassemia Genotyping Kit hoạt động dựa trên việc nhân bản những vùng trình tự đặc trưng bao quanh 4 vị trí có khả năng xảy ra đột biến bằng các cặp mồi đặc hiệu và điện di sản phẩm PCR để quan sát kết quả. Mỗi mẫu xét nghiệm được phân tích bằng 2 phản ứng Long-range PCR. Hỗn hợp phản ứng chứa các cặp mồi đặc hiệu cho từng vùng trình tự chứa vị trí có thể xảy ra đột biến, cụ thể như sau:

– Hỗn hợp phản ứng A (Mix A): chứa các cặp mồi phát hiện đột biến –SEA, -α3.7
– Hỗn hợp phản ứng B (Mix B): chứa các cặp mồi phát hiện đột biến –THAI, -α4.2

Quy trình xét nghiệm:

Quy trình xét nghiệm AccuLite Alpha-Thalassemia Genotyping Kit (RUO) bao gồm các bước sau:

1. Thu thập mẫu bệnh phẩm
2. Chiết xuất DNA từ mẫu bệnh phẩm
3. Khuếch đại DNA bằng phương pháp real-time PCR
4. Phân tích kết quả bằng phần mềm chuyên dụng

Tài liệu tham khảo:

• Thông tin về bệnh α-thalassemia:

– https://www.cdc.gov/ncbddd/thalassemia/facts.html

– https://www.thalassemia.org/

– https://www.nhlbi.nih.gov/health/thalassemia